Определение ДНК возбудителей инфекционных заболеваний методом ПЦР

Метод ПЦР является высокоточным вариантом диагностики, позволяющий обнаружить множество различных инфекций. Исследование основывается на определении ДНК или РНК человека во взятом биоматериале. У пациента берут кровь, слюну, мокроту, выделения из половых органов. Конкретный выбор зависит от целей процедуры.

Применение метода

ПЦР имеет следующие особенности:

1. Помогает выявить возбудителя инфекции даже при условии, что в пробе присутствует только несколько его молекул, что показывает эффективность методики.
2. Позволяет избежать использования трудоемких микробиологических способов при поиске медленно растущих бактерий, вирусов. Этот подход особенно актуален для сферы гинекологии и урологии, когда проводится диагностика ИППП.
3. Помогает обнаружить различные инфекции вирусного типа, включая гепатиты, ВИЧ и прочее. Результат достигается за счет высокой чувствительности метода.
4. Позволяет оценить эффективность лечения. ПЦР определяет, снизилось ли количество возбудителей после лечения или инфекция прошла полностью.
5. Помогает при диагностике онкологических патологий.

Специфичность

Методика обладает 100% чувствительностью при выявлении вирусных, бактериальных инфекций, включая хламидийные, уреаплазменные и прочее. ПЦР способен обнаружить в материале даже одну клетку возбудителя. Подобное исследование часто используют для обнаружения инфекции, когда другие способы обследования оказываются низкоэффективными.

Подготовка к анализу

Чтобы анализ был точным и достоверным, пациенту необходимо подготовиться:

1. Кровь сдается утром, на пустой желудок. Требуется, чтобы за 8 часов до проведения анализа пациент ничего не пил и не принимал пищу.
2. Рекомендуется воздержаться от курения, жвачки.
3. Если сдается кровь на вирусные гепатиты, за 2 дня до анализа из рациона исключают цитрусы и любые овощи, фрукты оранжевого цвета.
4. Перед соскобом из уретры нельзя мочиться 2 часа.
5. Мазок из носоглотки и зева сдается натощак. Прием пищи исключается за 4 часа до исследования.
6. За сутки до анализа рекомендуется воздержаться от половых контактов.

При исследовании на выявление возбудителей бактериальных патологий необходимо, чтобы прошло минимум 2 недели с момента последнего приема антибиотиков.

Проведение процедуры

Исследование проводится к амплификаторе. Это специальный прибор, при помощи которого с определенной периодичностью происходит высокоточный нагрев и охлаждение пробирок.

Дополнительно в пробирку могут добавить высококипящее масло. Это нужно, чтобы реакционная смесь не испарилась. Дополнительно могут использоваться специфические ферменты, что позволяет сделать выход ПЦР-реакции больше.

Как проходит реакции

За одно исследование часто проводится 20-35 циклов. И все они включают прохождение нескольких стадий:

1. Денатурация. На этом этапе происходит разрушение водородных связей у цепей. ДНК-матрица нагревается до 94-98 градусов на некоторое время, от 0.5 до 2 минут. Это позволит обеспечить расход двух цепей. Иногда предварительно прогревают смесь в течение нескольких минут, и только затем запускается первый цикл.
2. Отжиг. На следующем этапе понижается температура. Это позволяет праймерам связаться с одноцепочечной матрицей. Температура отжига выбирается примерно на 4-5 градусов ниже, чем уровень плавления праймера. Цикл длится от 30 секунд до 2 минут.
3. Элонгация. Праймер используется как затравка. Температура выбирается в зависимости от полимеразы. Часто она составляет около 72 градусов. Процесс длится примерно минуту для каждой 1000 пар оснований.

Когда все циклы завершены, стадия элонгации может быть проведена повторно. Это позволяет получить все одноцепочные фрагменты. Финальная стадия занимает около 10-15 минут.

Как записаться в ГОИКБ

Чтобы записаться на сдачу анализов, можно воспользоваться одним из следующих способов:

1. При помощи звонка в приемное отделение по телефону 8-0152-43-52-09.
2. Через регистратуру. Больница располагается по адресу: г. Гродно, б-р Ленинского Комсомола, д. 57.
3. Через официальный сайт клиники. Достаточно заполнить форму и отправить заявку.

Оплата производится как наличными, так и банковской картой. По указанному выше телефону можно проконсультироваться по интересующим вопросам.

Стоимость исследования в ГОИКБ